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拉曼光谱典型问题集锦(一)
编辑:广州誉立电子科技有限公司   时间:2019-04-11

一、如何用拉曼光谱仪测透明的有机物液体,测试时放到了玻璃片上测出来的结果是玻璃的光谱。

1.应该是聚焦位置不对,聚在玻璃上了,我以前也犯过同样的错误。

2.用凹面载玻片,液体量会比较多,然后用显微镜聚焦好就可以了,如果,液体有挥发性,一定要在液体上用盖玻片,然后,焦点聚焦到盖玻片以下。

3.建议:

1)有机液体里面的分析物质浓度多大? Raman测定的是散射光,所以在溶液中的强度相对比较底,故分析物浓度要大些。

2)你用的是共聚焦Raman吗?聚焦点要在毛细管的溶液里面才好。可以在溶液中放点“杂物”方便聚焦。

3)玻璃是无定形态物质,应该Raman信号比较弱才对。

二、我们这里有做生物样品的拉曼光谱的,在获得的图里面有很强的荧光,有的说,如果拉曼得不到就用其荧光谱。可我想问一下,在拉曼谱里面得到的荧光背景,是真正的荧光特征谱吗?这和荧光光谱仪里面的荧光图有什么区别? 

1.原则上说,拉曼谱中的荧光和荧光谱中的荧光是一样的,只要激发波长和功率密度相同。注意横坐标要从波数变换为纳米,即用10000000nm25px)除以波数就行了。但有一点要注意,不同波长的激发光照射样品,得到的拉曼相近,但荧光可以有很大不同,甚至相同波长不同功率激发,荧光谱都大不一样。

2.“注意横坐标要从波数变换为纳米,即,用10000000nm25px)除以波数就行了”?

Raman测定的是散射光,得到的是Raman shift.Raman shift和波长(荧光光谱)之间要一个转换的吧。

3.生物样品一般荧光峰比较宽,用荧光光测试之前一般先会做仪器本身曲线校正也就是仪器本身的响应曲线,这样测出的荧光峰才比较准,特别是对于宽峰更要做这个较准。

Raman光谱一般采集的区域比较窄(指的是波长区域),一般在窄的波长范围变化不大,因此一般不考虑仪器本身响应曲线误差,但是Raman光谱来测宽荧光峰,影响就比较大。 

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